熒光檢測器在離子色譜的應用

熒光檢測器的最大優(yōu)點是有極高的靈敏度和良好的選擇性，一般來說，它比紫外吸收檢測器的靈敏度要高10～1000倍，可達μg／L級，而且它所需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的用途。
某些物質雖然本身不能產生熒光，但含有適當?shù)墓δ軋F可與熒光試劑發(fā)生衍生反應，生成熒光衍生物，也可用熒光檢測。衍生方法有兩種，其一為柱前衍生，此法較簡單，但定量重復性較差；其二為柱后衍生，此法重復性好，但會造成譜峰的擴展。在離子色譜中，可以采用柱后衍生的方式對氨基酸和肽進行分析。
早期的熒光檢測器在離子色譜分析中的應用主要是采用離子色譜分離氨基酸，然后經柱后衍生，用熒光檢測器檢測。隨著離子色譜技術的發(fā)展，目前離子色譜的氨基酸檢測，已經可以采用通用的紫外檢測器，或不經柱后衍生，直接利用脈沖安培檢測，熒光檢測器的離子色譜的應用也趨于減少。
隨著離子色譜的廣泛應用，特別是新的色譜柱發(fā)展，使離子色譜的應用范圍從常規(guī)的陰離子發(fā)展到大量無機、有機可電解物質的測定，特別對環(huán)境中痕量的有機物的分析，采用紫外檢測器往往難以達到較高靈敏度和較好檢測限。為此，我們將離子色譜與熒光檢測器聯(lián)用，用于測定痕量的有機污染物，使靈敏度大大提高，檢測限水平比紫外檢測器降低2～3個數(shù)量級。一般強熒光物質往往具備如下特征：
（1）具有大的共軛π鍵結構。
（2）具有剛性的平面結構。
（3）具有最低的單線電子激發(fā)態(tài)。
（4）取代基團為給電子取代基。因此，熒光檢測特別適用于含有-NH2，-NHR，-NR2，-OH，-OR，-CN基團，又含有多環(huán)芳烴的化合物，而這類化合物只要溶于水，均可以采用離子色譜分離。
例如采用陽離子交換分離，熒光檢測器可以測定2-和4-氨基萘，采用熒光檢a析方法。
pH值對可離子化的某些熒光化合物的影響很大。例如未解離的苯酚和苯胺分子會產生熒光，但其離子卻不產生熒光。苯酚在pH=1的溶液中熒光最強，而pH=13的溶液中無熒光；苯胺在pH7～12的溶液中能產生熒光，而在pH＜2和pH＞13的溶液中都不產生熒光。
在紫外光照射下能產生熒光的化合物，絕大多數(shù)為環(huán)狀化合物，但環(huán)狀結構并不是產生熒光的必要條件。某些鏈狀化合物如硬脂酸鹽、棕櫚鹽也同樣可產生熒光。