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    9. 離子色譜法同肘測(cè)定糖類和有機(jī)酸

      發(fā)布于 2013/12/17閱讀(1693)來源 zxj標(biāo)簽 離子色譜

      摘要

      本文介紹用電導(dǎo)和脈沖安培檢測(cè)的離子色譜同時(shí)測(cè)定一元有機(jī)酸和糖類的方法.

      內(nèi)容

        離子色譜法(IC)是一種十分有用的技術(shù),它可以進(jìn)行痕量無機(jī)陰離子、無機(jī)陽離子和有機(jī)酸的測(cè)定。用抑制型離子色譜法測(cè)定有機(jī)酸已有過報(bào)道 一元有機(jī)酸如乳酸、乙酸. 乙醇酸、甲酸、丙酮酸能通過陰離子交換柱分離,然后以抑制電導(dǎo)法靈敏地進(jìn)行檢測(cè)。
      脈沖安培檢測(cè)器是離子色譜法的一種新的檢測(cè)技術(shù),對(duì)于易氧化的物質(zhì),特別是多羥基物質(zhì)和糖類,是很有用的測(cè)定手段。脈沖安培檢測(cè)器與高效陽離子交換柱結(jié)合,為糖類的測(cè)定提供了快速, 方便和靈敏的分析方法。
      本文描述的離子色譜系統(tǒng)在脈沖安培檢測(cè)之后再串連化學(xué)抑制器進(jìn)行電導(dǎo)檢測(cè), 以此對(duì)糖類和一元有機(jī)酸包括甘露醇,鼠李糖,葡萄糖,果糖、乳糖、蔗糖,棉子糖、麥芽糖、乳酸, 己醇酸、甲酸 丙酮酸進(jìn)行同時(shí)測(cè)定。
          實(shí)驗(yàn)部分
          (一)儀器和試劑
          Dionex 4000i型離子色譜儀, 配以電導(dǎo)檢測(cè)器和金電極脈沖安培檢測(cè)器,Dioncx HPLC-AG6和HPLC-AS6色譜柱。Houston Instruments雙筆記錄儀,HP4270積分儀。Dionex AMMS微膜抑制器。
      各溶液, 包括離子色譜淋洗液, 均以分析純?cè)噭┖投稳ルx子水配制。
          (=)色落條件
          淋洗液0.080mol/L NaOH, 流速I m1/miI1,保護(hù)柱HPIC—AG6,分離柱HPIC-AS6,抑制柱AMMS,再生液50mmol/L H2SO4,流速5.0ml/min進(jìn)樣體積50μl檢測(cè)電勢(shì)E10.20V,持續(xù)時(shí)問t1:60ms正清洗電勢(shì)E2:0.60V,持續(xù)時(shí)間t2:60ms, 負(fù)清洗電勢(shì)Es持續(xù)時(shí)間t3:3240ms。
          (三)測(cè)定方法
          在色譜開始進(jìn)行之前, 先用電導(dǎo)檢測(cè)以確認(rèn)在不同淋洗掖時(shí)各一元有機(jī)酸的保留時(shí)間。由于選擇的淋洗液濃度較大,必須對(duì)淋洗液、再生液和各自的流速進(jìn)行優(yōu)化以提供低的背景電導(dǎo)和好的基線。然后,連接各組件,將脈沖安培檢測(cè)器連在系統(tǒng)內(nèi),以測(cè)定各糖類。
          結(jié)果與討論
          (一)穩(wěn)定性和重現(xiàn)性
          對(duì)混合十三個(gè)組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定其穩(wěn)定性和重現(xiàn)性,連續(xù)測(cè)定九次。
          看出峰高和保留時(shí)間均有良好的重現(xiàn)性。不同一天測(cè)定時(shí), 也沒有顯著差異。
          (二)檢測(cè)限,線性范圍和線性關(guān)系
          從結(jié)果看用離子色譜法測(cè)定以上各物不僅有很低的檢測(cè)限,而且有很寬的線性范圍。以峰面積積分值計(jì)算,各酸類在0~100μg/ml時(shí)的線性關(guān)系。
          同樣濃度下,對(duì)葡萄糖、果糖, 蔗糖以峰高計(jì)算其線性關(guān)系如下t葡萄糖Y=1.60c+2.70,r= 0.9997。
          從以上結(jié)果看, 各組分均有良好的線性關(guān)系, 因此用離子色譜法測(cè)定時(shí),準(zhǔn)確度較好。
          (三)各組分的色譜分離情況
          按照上述標(biāo)準(zhǔn)條件測(cè)定, 典型的色譜圖可見五種酸到達(dá)電導(dǎo)檢測(cè)器時(shí), 基本不發(fā)生重疊現(xiàn)象。而用脈沖安培檢測(cè)糖類時(shí),甘露醇與鼠李糖、葡萄糖與果糖、乳糖與蔗糖之間有部分重疊, 但對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大。值得注意的是,當(dāng)乙酸存在時(shí),乙酸稻乳酸將發(fā)生重疊, 難以分辨。
          應(yīng)用實(shí)例
          用此法測(cè)定飲料中的糖類和一元有機(jī)酸十分方便, 一般不必經(jīng)過特定的前處理, 只要稀釋后通過0.45μm的濾膜直接進(jìn)樣,便可進(jìn)行測(cè)定。我們對(duì)黃酒和啤酒進(jìn)行了測(cè)定。

       

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